GRα-GST融合表达载体的构建及重组蛋白的表达

• 作者: 孙静 徐莉 涂继方 温成平 谢志军
• 来源期刊: 浙江中医药大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 糖皮质激素受体α 融合蛋白 原核表达 pGEX-4T-1载体
• 年，卷（期）: 2012,（11）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 1211-1213,1217
• 页数: 4页
• 分类号: R331
• 字数: 2414字
• 语种: 中文

摘要

[目的]构建GRα-GST融合表达载体并获得重组蛋白,以期为筛选类糖皮质激素样中药提供工具.[方法]运用RT-PCR扩增得到包含CDS的GRα基因序列后,经T-A克隆插入PMD-18载体.以此重组载体为模板扩增含有BamH I与Xho I酶切位点的GRαORF,插入pGEX-4T-1载体后形成了重组载体,并使其在大肠杆菌BL21中经IPTG诱导表达融合蛋白,再用SDS-PAGE检测融合蛋白的表达.[结果]成功的将GRα-全基因构建入原核表达载体pGEX-4T-1中.测序结果表明载体构建成功,无插入和移码突变.经IPTG诱导后获得与预测大小(112kDa)完全一致的目的蛋白即GRα-GST融合蛋白.[结论]成功获得了含重组载体的大肠杆菌,并在IPTG诱导下较好的表达,得到了GRα-GST融合蛋白.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	谢志军		106	516	12.0	18.0
2	温成平		188	957	17.0	23.0
3	孙静		31	136	7.0	10.0
4	徐莉		44	251	9.0	14.0
5	涂继方		4	1	1.0	1.0