条斑紫菜R-藻红蛋白酶解物的制备及其抗氧化和肿瘤细胞增殖抑制活性

• 作者: 方勇 施瑛 杨文建 杨方美 胡秋辉 赵殿峰 赵立艳 辛志宏 马宁
• 来源期刊: 中国农业科学
• 学科: 经济
• 关键词: 条斑紫菜 藻红蛋白 木瓜蛋白酶 酶解物 抗氧化 抑瘤活性
• 年，卷（期）: 2012,（15）
• 所属期刊栏目: 研究简报
• 页码范围: 3222-3230
• 分类号: F3
• 语种: 中文

摘要

[目的]研究木瓜蛋白酶对条斑紫菜R-藻红蛋白的抗氧化性和肿瘤增殖抑制活性的影响.[方法]采用超声波破壁法提取条斑紫菜R-藻红蛋白,用DEAE柱层析法纯化后进行木瓜蛋白酶酶解,通过正交试验设计,以还原力A700为考察指标确定酶解反应的最佳工艺参数,进一步测定获得的R-藻红蛋白及其酶解物的还原力、清除羟自由基能力和对人肉瘤细胞U2O及人肝癌细胞HepG-2的肿瘤增殖抑制活性.[结果]R-藻红蛋白的最佳酶解工艺条件为:木瓜蛋白酶添加量25000 U·g-1,pH 7.0,温度50℃,酶解时间4h.在此条件下,R-藻红蛋白酶解物还原力为0.573,较未酶解的R-藻红蛋白提高了2.35倍；清除羟自由基能力为51.03％,较未酶解的R-藻红蛋白活性提高了3.22倍.随着浓度的增加,R-藻红蛋白及其酶解物对人肉瘤细胞U2O和人肝癌细胞HepG-2抑制生长作用增强.R-藻红蛋白对人肉瘤细胞U2O抑制作用的IC50值为2431.32 μg·mL-1,其酶解物IC50值降低为1271.46μg·mL-1.R-藻红蛋白对肝癌细胞HepG-2抑制作用的IC50值为1593.61 μg·mL-1,其酶解物IC50值降低为512.05 μg·mL-1.[结论]经木瓜蛋白酶酶解后,R-藻红蛋白酶解物具有较强的抗氧化和抑瘤活性.酶解技术可作为进一步提高R-藻红蛋白生物活性的有效手段.