绵羊Gfrα1基因的部分cDNA克隆与抗原表位多肽的原核表达

• 作者: 刘林洪 刘燕 包佳婧 单飞彪 吴应积 罗奋华
• 来源期刊: 畜牧兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 绵羊 Gfrα1基因 克隆 序列分析 原核表达
• 年，卷（期）: 2012,（9）
• 所属期刊栏目: 遗传繁育
• 页码范围: 1377-1384
• 分类号: S826|Q785
• 字数: 5780字
• 语种: 中文

摘要

旨在克隆绵羊Gfrα1基因序列,深入研究绵羊精原干细胞(SSCs).本研究通过RT-PCR扩增和分子克隆的方法克隆到了绵羊Gfrα1基因的编码区大部分片段.结果,克隆得到的绵羊Gfrα1基因的大部分cDNA序列长1 312 bp,包括1 311 bp的开放阅读框(ORF),编码437个氨基酸,与牛、人、黑猩猩、大鼠和小鼠相应核苷酸序列的同源性分别为98.5％、91.3％、91.0％、88.9％和88.0％.根据获得的cDNA序列,预测已知片段的抗原表位区,并将抗原表位区序列插入pET-44a(+)载体,经转化得到重组菌,经IPTG诱导表达,并通过亲和柱层析,纯化制备GFRα1抗原表位多肽.Western blot检测发现,经诱导表达的GFRα1抗原表位多肽约为18.2 ku,与预测的大小一致.绵羊Gfrα1基因的克隆和表达研究,为进一步制作该基因的多克隆抗体奠定基础,为绵羊SSCs的分子水平鉴定及功能分析提供了研究条件.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	罗奋华	内蒙古大学哺乳动物生殖生物学及生物技术教育部重点实验室	24	199	6.0	14.0
2	刘燕	内蒙古大学哺乳动物生殖生物学及生物技术教育部重点实验室	16	27	3.0	4.0
3	刘林洪	内蒙古大学哺乳动物生殖生物学及生物技术教育部重点实验室	3	0	0.0	0.0
4	包佳婧	内蒙古大学哺乳动物生殖生物学及生物技术教育部重点实验室	3	9	1.0	3.0
5	单飞彪	内蒙古大学哺乳动物生殖生物学及生物技术教育部重点实验室	2	14	1.0	2.0