绵羊Myostatin基因shRNA慢病毒载体的构建与鉴定

• 作者: 朱瑞良 盛鹏程 苗向阳
• 来源期刊: 中国兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: RNA干扰 shRNA 肌肉生长抑制素 慢病毒 qPCR
• 年，卷（期）: 2012,（4）
• 所属期刊栏目: 动物科学
• 页码范围: 628-632
• 分类号: S852.2
• 字数: 3228字
• 语种: 中文

摘要

针对绵羊Myostatin基因特异性序列,设计4对shRNA,并合成高表达载体。将干扰质粒和高表达载体瞬时共转染HEK293细胞,应用Real-time PCR鉴定干扰效率,将筛选到最有效的shRNA表达载体和pDONR221载体进行BP重组反应,以获得含干扰序列的入门载体。然后将含干扰序列的入门载体和慢病毒表达的目的载体pLenti6/BLOCK-iT-DEST进行LR重组反应,以获得含干扰序列的慢病毒表达载体。qPCR检测病毒物理滴度。结果本试验成功构建绵羊Myostatin基因RNAi慢病毒载体,病毒的滴度为：9.3×109 TU/mL。为研究Myostatin基因对肌肉生长的影响提供了稳定感染细胞载体。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	朱瑞良	山东农业大学动物科技学院	161	909	16.0	22.0
2	苗向阳	中国农业科学院北京畜牧兽医研究所	71	407	11.0	16.0