人NOB1基因shRNA慢病毒载体构建与RNAi效率的鉴定

• 作者: 崔满华 林杨 滕红 许天敏
• 来源期刊: 吉林大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: NOB1 短发夹RNA 慢病毒属
• 年，卷（期）: 2010,（2）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 258-261
• 分类号: Q78|R373-33
• 语种: 中文

摘要

目的:构建人NOB1基因的短发夹RNA(shRNA)慢病毒载体并在卵巢癌SKOV3和HEY细胞上鉴定其沉默效率.方法:针对NOB1基因设计特异性siRNA靶点,构建于慢病毒pLVTHM载体,筛选获得的有效shRNA慢病毒载体在293T细胞包装成病毒颗粒,随后将其感染卵巢癌SKOV3和HEY细胞,采用ReaI-time PCR方法检测靶基因在mRNA水平的沉默效率.结果:构建的慢病毒载体shRNA的PCR鉴定和测序正确,包装病毒后滴度达到8×10~8 PU·L~(-1).shRNA慢病毒颗粒感染SKOV3和HEY细胞后NOB1基因的mRNA表达量较阴性对照载体慢病毒感染组分别下降了73.5%和82.2%.结论:成功构建NOB1基因的shRNA慢病毒表达载体,该慢病毒表达载体能够在细胞水平有效沉默靶基因.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	崔满华	吉林大学第二医院妇产科	210	1049	13.0	24.0
2	许天敏	吉林大学第二医院妇产科	89	363	11.0	16.0
3	林杨	吉林大学第二医院妇产科	23	76	6.0	7.0
4	滕红	吉林大学第二医院妇产科	44	137	7.0	9.0