湘油15 PGIP9蛋白基因的克隆和蛋白序列结构分析及原核表达

• 作者: 刘睿洋 官春云 皇甫海燕 靳芙蓉
• 来源期刊: 作物研究
• 学科: 生物学
• 关键词: 甘蓝型油菜 多聚半乳糖醛酸酶抑制蛋白 原核表达 序列分析 结构预测
• 年，卷（期）: 2012,（2）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 134-138
• 分类号: Q78
• 字数: 3243字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1001-5280.2012.02.07

摘要

运用生物信息学软件对湘油15 PGIP9基因的核苷酸、蛋白氨基酸序列进行分析,并对其蛋白结构进行预测.结果表明:湘油15 PGIP9编码区CDS长1011 bp,编码336个氨基酸的开放阅读框,分子量为37.5kDa,等电点为7.9.N端1～22个氨基酸是信号肽,且这一区域疏水性较强,具有5个潜在的N-糖基化位点.N端和C端还各具有4个参与二硫键形成的半胱氨酸残基.二级结构显示有11个α-螺旋,14个β-延伸和25个无规则卷曲.中心LRR结构域由6个串联的LRR基序组成.随后将PGIP9的CDS序列亚克隆到原核表达载体pET -32a(+)中,构建pET - 32a - PGIP9重组表达质粒,并转化E.coil BL21(DE3),25℃,终浓度为0.2 mmol/L和0.5 mmol/L的IPTG诱导2h,都成功的表达了融合蛋白pET - 32a - PGIP9,其分子量约为52kDa,发现主要以包涵体形式存在.没有可溶形式的蛋白表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	官春云	国家油料作物改良中心湖南分中心	35	511	13.0	22.0
2	刘睿洋	湖南农业大学油料作物研究所	3	14	2.0	3.0
3	皇甫海燕	国家油料作物改良中心湖南分中心	1	3	1.0	1.0
4	靳芙蓉	国家油料作物改良中心湖南分中心	1	3	1.0	1.0