人源性Jagged1RNAi慢病毒载体的构建及鉴定

• 作者: 刘海潮 吴纪楠 廖贵清 张同韩 梁玉洁 梁立中 黄洪章
• 来源期刊: 广东医学
• 学科: 医学
• 关键词: Notch信号 Jagged1 舌癌 RNA干扰 慢病毒
• 年，卷（期）: 2012,（7）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 903-907
• 分类号: R346
• 字数: 3341字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1001-9448.2012.07.010

摘要

目的 构建人源性Jagged1 RNAi慢病毒载体,并观察其对舌癌细胞中Jagged1的敲减作用.方法 GenBank检索人Jagged1信息,设计Jagged1靶点.BLAST比对同源性,合成双链DNAoligo.线性化的RNA干扰载体质粒pAJ-U6-shRNA-CMV-eGFP/PuroR,双酶切,与合成的双链DNAoligo连接,转化感受态细胞,选择阳性克隆进行鉴定.慢病毒三质粒系统共转染293T细胞,包装,纯化,并转染Tca8113以及Cal27细胞,测定转染效率.PCR及Western Blot 检测Jagged1基因及蛋白表达变化.结果 成功构建靶向Jagged1 RNAi载体质粒,并成功进行慢病毒包装.该系统可有效地感染Tca8113及Cal27细胞.细胞内Jagged1基因及蛋白表达均有明显下调.结论 成功构建Jagged1RNAi慢病毒载体,为下一步研究Jagged1在人舌鳞癌的中的作用机制奠定基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	吴纪楠	广东省中山市人民医院口腔医疗中心	14	31	3.0	5.0
2	张同韩	广东省中山市人民医院口腔医疗中心	4	1	1.0	1.0