实时定量PCR构建法夫酵母内参基因β-actin、 gpd、18S rRNA标准品质粒和标准曲线

• 作者: 倪辉 李利君 李天丽 蔡慧农 郑晨华
• 来源期刊: 激光生物学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 实时定量PCR 法夫酵母 标准质粒 标准曲线
• 年，卷（期）: 2013,（4）
• 所属期刊栏目: 应用研究
• 页码范围: 379-384
• 页数: 6页
• 分类号: Q786
• 字数: 4501字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-7146.2013.04.016

摘要

为建立检测法夫酵母JMU-MVP14中虾青素合成相关基因在不同生长时期表达水平的实时定量PCR方法,构建法夫酵母JMU-MVP14的管家基因β-actin、gpd、18S rRNA的标准质粒,进行实时定量PCR,制作标准曲线及回归方程.β-actin基因标准曲线相关系数(R2)=0.9956,扩增效率(E) =96.93％;gpd基因标准曲线相关系数(R2) =0.9901,扩增效率(E) =93.78％;18S rRNA基因标准曲线相关系数(R2) =0.9981,扩增效率(E)=98.76％.3个基因片段的熔解曲线均呈单峰;扩增曲线呈典型的S型动力学曲线,指数期和平台期明显,为理想的熔解曲线和扩增曲线.用geNorm软件对三个管家基因的稳定性进行分析,三个基因的稳定性排序为β-actin＞ 18S rRNA＞ gpd,故β-actin和18S rRNA较适合作为研究法夫酵母JMU-MVP14定量实验的内参基因.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	倪辉	集美大学生物工程学院	155	1014	16.0	24.0
4	郑晨华	集美大学生物工程学院	3	18	2.0	3.0
11	李利君	集美大学生物工程学院	49	232	9.0	12.0
12	李天丽	集美大学生物工程学院	3	11	2.0	3.0