表达羧基端融合HA表位N蛋白的重组小反刍兽疫病毒的拯救及鉴定

• 作者: 步志高 殷倩倩 温志远 王喜军 胡倩倩 葛金英 陈伟业
• 来源期刊: 中国预防兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 小反刍兽疫病毒 N蛋白 HA表位 标记疫苗
• 年，卷（期）: 2013,（6）
• 所属期刊栏目: 病原生物学
• 页码范围: 456-459
• 页数: 4页
• 分类号: S852.65
• 字数: 2587字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1008-0589.2013.06.07

摘要

为构建小反刍兽疫(PPR)标记疫苗,本研究以PPR病毒(PPRV)反向遗传操作系统为基础,将编码HA表位(YPYDVPDYA)的序列融合连接于PPRV感染性全长cDNA N基因的3’末端构建感染性克隆质粒pNg75/1-GFP/NHA,将其与辅助质粒pCAGGS-N、pCAGGS-P、pCAGGS-L共转染Vero细胞救获表达融合HA表位N蛋白的重组病毒rPPRV/GFP/NHA.Western blot和间接免疫荧光试验表明融合HA表位的N蛋白获得正确表达；体外生长动力学试验分析表明rPPRV/GFP/NHA的生长最高滴度可达106.2 TCID50/mL,能够满足标记疫苗的使用要求.本研究结果为进一步研制PPRV标记疫苗奠定基础.