HBV融合抗原真核表达载体pIRES-neo-HBAg的构建及表达

• 作者: 于继云 吴昊 朱晓明 王宇 王琳 蒋建利 阎瑾琦
• 来源期刊: 细胞与分子免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 乙型肝炎病毒 HBV融合抗原 真核表达 pIRES-neo 293T细胞
• 年，卷（期）: 2013,（5）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 469-472
• 分类号: R392.12|R512.6+2
• 语种: 中文

摘要

目的 构建HBV融合抗原真核表达质粒pIRES-neo-HBAg,并验证其在293T细胞中的表达.方法 以含有HBV融合抗原的质粒pVAX1-HBV为模板,PCR扩增该融合基因.PCR产物经纯化后,将其克隆至载体pMD18-T中,构建pMD18-T-HBV质粒,经酶切和测序鉴定后,将其定向克隆入真核表达载体pIRES-neo,获得真核表达质粒pIRES-neo-HBAg.将该重组表达质粒瞬时转染人293T细胞,采用Western blot法、流式细胞术和免疫荧光细胞化学技术验证HBV融合抗原的表达.结果 成功构建了HBV融合抗原真核表达质粒pIRES-neo-HBAg,Western blot法、流式细胞术和免疫荧光细胞化学技术结果显示融合抗原能够在293T细胞中表达.结论 成功构建了HBV融合抗原真核表达质粒pIRES-neo-HBAg.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	阎瑾琦	军事医学科学院基础医学研究所	25	54	4.0	5.0
2	于继云	军事医学科学院基础医学研究所	59	145	6.0	9.0
3	王琳	第四军医大学细胞工程研究中心	77	375	12.0	16.0
4	蒋建利	第四军医大学细胞工程研究中心	30	145	6.0	11.0
5	王宇	军事医学科学院基础医学研究所	8	11	2.0	2.0
6	吴昊	军事医学科学院基础医学研究所	1	0	0.0	0.0
7	朱晓明	军事医学科学院基础医学研究所	5	1	1.0	1.0