FOLR1慢病毒表达载体的构建及鉴定

• 作者: 尹巧云 张玮 李力 李状 王琪 黄明钜
• 来源期刊: 生物医学工程学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 叶酸结合蛋白1 慢病毒表达载体 卵巢癌
• 年，卷（期）: 2013,（3）
• 所属期刊栏目: 新技术与新方法
• 页码范围: 641-645,650
• 页数: 6页
• 分类号: R737.31
• 语种: 中文
• DOI: 10.7507/1001-5515.20130120

摘要

本研究通过构建叶酸结合蛋白1(FOLR1)基因的慢病毒表达载体并进行表达鉴定.采用PCR技术扩增出基因全长,克隆至pWPI载体质粒,重组阳性克隆行PCR和测序鉴定,将重组载体质粒与辅助质粒共同转染人肾上皮(293T)细胞包装病毒,病毒颗粒感染人卵巢上皮癌(SKOV3)细胞,流式分选,RT-PCR和Western blot检测病毒感染后细胞中的FOLR1基因和蛋白表达.经鉴定结果显示重组载体质粒构建成功,293T细胞高效包装此慢病毒,携带FOLR1基因的慢病毒感染SKOV3细胞后可见大量绿色荧光细胞,流式分选后经两种方法分别检测出FOLR1基因和蛋白稳定表达.这为探讨FOLR1基因在卵巢恶性肿瘤中的生物学功能提供了实验基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李力		377	1810	20.0	26.0
2	张玮		149	564	13.0	17.0
3	王琪		87	263	8.0	11.0
4	李状		12	21	3.0	3.0
5	黄明钜		2	5	1.0	2.0
6	尹巧云		2	4	1.0	2.0