ZBTB5基因真核表达质粒的构建及其在HEK293T细胞中的表达

• 作者: 姜玉新
• 来源期刊: 泰山医学院学报
• 学科: 医学
• 关键词: ZBTB5 GFP Western blot 真核表达载体
• 年，卷（期）: 2013,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 241-244
• 页数: 4页
• 分类号: R34
• 字数: 2917字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-7115.2013.04.001

摘要

目的 构建ZBTB5基因的真核表达质粒,并检测其在细胞内的表达.方法 以pET-28a (+)-ZBTB5质粒为模板,以ZBTB5全长编码基因特异性引物进行PCR扩增,将ZBTB5全长基因插入至pcDNA3.1-GFP真核表达载体构建重组pcDNA3.1-ZBTB5-GFP质粒.将该重组质粒双酶切及测序鉴定后,转染至HEK 293T中,荧光显微镜下及Western blot分别检测GFP和ZBTB5在细胞中的表达.同时设置pcDNA3.1和pcDNA3.1-GFP载体为对照.结果 酶切及测序证实成功构建了真核表达重组载体pcDNA3.1-ZBTB5-GFP.荧光显微镜下可见GFP的表达,Western blot检测到融合蛋白ZBTB5-GFP的表达.结论 成功构建真核表达质粒pcDNA3.1-ZBTB5-GFP,为探讨其进一步的功能奠定基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	姜玉新	皖南医学院生理学教研室	98	399	10.0	14.0