果蝇 EF －1α蛋白的原核表达及多克隆抗体制备

• 作者: 任恋 吴秀山 彭佩莹 戴悦 王盼盼 袁婺洲
• 来源期刊: 怀化学院学报
• 学科: 生物学
• 关键词: EF-1α 果蝇 原核表达 多克隆抗体
• 年，卷（期）: 2013,（5）
• 页码范围: 33-36
• 页数: 4页
• 分类号: Q986
• 字数: 2355字
• 语种: 中文

摘要

为进一步研究延长因子－1（elongation factor －1α，EF －1α）在调控心脏发育和果蝇心脏功能中发挥的作用，制备延长因子－1的抗体.利用生物信息学选择果蝇 EF －1α基因抗原亲水区，并设计出特异性引物，PCR 扩增出的片段克隆到原核表达 pET －28a 载体中，转入 E ．coli 中后通过 IPTG 诱导融合蛋白表达，将 His － EF －1α融合蛋白免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体，再用 Western Blot 检测抗体的效价和特异性.研究结果表明，获得了 EF －1α原核表达重组融合蛋白以及高效价的、特异性兔抗 EF －1α多克隆抗体. EF －1α多克隆抗体的效价可以达到1比1500，并且有很强的特异性，为后续研究 EF －1α基因在心脏发育和心脏功能中的作用奠定了基础.