RUNX3全长和不同结构域原核表达载体的构建及其重组蛋白表达

• 作者: 宋艳艳 王桂玲
• 来源期刊: 吉林大学学报（医学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: RUNX3 载体 蛋白诱导 蛋白表达
• 年，卷（期）: 2013,（6）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 1112-1115
• 页数: 4页
• 分类号: Q257
• 字数: 2968字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7694/jldxyxb20130606

摘要

目的:构建RUNX3全长和不同结构域的原核表达载体并表达其重组蛋白.方法:以pcDNA3.1myc-RUNX3为模板,采用PCR法扩增RUNX3全长和各个结构域片段,通过EcoR Ⅰ和BamHⅠ酶切位点将RUNX3全长和不同结构域定向插入谷胱甘肽转移酶(GST)融合表达载体pGEX-4T-2中,在大肠杆菌(E.coli) BL21中诱导其融合蛋白表达,SDS PAGE电泳检测其蛋白表达情况.结果:EcoR Ⅰ和BamH Ⅰ双酶切后得到与预期大小相符的FL(1 245 bp)、△Runt (843 bp)、Nter (159 bp)、Runt (402 bp)和Cter (684 bp)5个载体片段.SDS-PAGE电泳检测,RUNX3全长及各个结构域截短GST-RUNX3截短融合蛋白(GST-FL、GST-Runt、GST-Nter和GST Cter)相对分子质量分别为72 000、40 000、32 000和51 000.结论:成功构建RUNX3全长和各个结构域截短的GST标签的原核表达载体,并实现其重组蛋白在原核细胞中的表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王桂玲	中国医科大学细胞生物学教研室卫生部细胞生物学重点实验室	25	137	7.0	11.0
2	宋艳艳	中国医科大学细胞生物学教研室卫生部细胞生物学重点实验室	4	1	1.0	1.0