大鼠组织激肽释放酶8重组腺病毒载体的构建及鉴定

• 作者: 刘铁牛 曹步清
• 来源期刊: 国际检验医学杂志
• 关键词: 组织激肽释放酶8 腺病毒载体 逆转录聚合酶链反应
• 年，卷（期）: 2013,（18）
• 所属期刊栏目: 基础实验研究论著
• 页码范围: 2355-2357
• 页数: 3页
• 字数: 3068字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-4130.2013.18.002

摘要

目的 构建大鼠组织激肽释放酶8(KLK8)的腺病毒表达载体,为进一步研究KLK8对心肌细胞的作用提供实验基础.方法 采用AdEasy系统构建携带外源性KLK8编码基因的重组腺病毒载体pAd-KLK8,转染AD-293细胞包装产生重组腺病毒Ad-KLK8,TCID50法对收获病毒进行滴度鉴定,RT-PCR及Western-blot方法检测目的基因在Hela细胞的表达.结果 PCR、序列测定以及限制性酶切证实KLK8基因正确插入腺病毒表达载体,并在AD-293细胞中包装出重组腺病毒;收获病毒的滴度为3.16×1012 IU/mL.结论 成功构建pAd-KLK8重组腺病毒表达载体,且重组腺病毒在Hela细胞能有效表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	曹步清	中国人民解放军第三○三医院检验科	2	3	1.0	1.0
2	刘铁牛	中国人民解放军第三○三医院检验科	9	19	3.0	4.0