草鱼(Ctenopharyngodon idellus)NCCRP-1基因的克隆和原核表达

• 作者: 代礼平 吴灶和 汤菊芬 王蓓 简纪常 蔡佳 鲁义善 黄郁葱
• 来源期刊: 生物技术通报
• 关键词: 草鱼 NCCRP-1 克隆 原核表达
• 年，卷（期）: 2013,（11）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 105-111
• 语种: 中文

摘要

应用RACE PCR克隆了草鱼NCCRP-1基因.结果表明,NCCRP-1 cDNA全长900bp,开放阅读框为714 bp,编码237个氨基酸残基,预测分子量为27.3 kD,理论等电点为5.63.草鱼NCCRP-1具有NCCRP-1蛋白家族保守的功能区域,与鲤鱼该基因(Cyprinus carpio L.)的相似性为88％.将此基因定向插入原核表达载体pET-32a,构建重组质粒pET-NCCRP后转化BL21(DE3)进行诱导表达.SDS-PAGE分析显示在47.8 kD处出现特异性蛋白条带,Western blot检测表明草鱼NCCRP-1融合蛋白成功表达.