含有扩增内标的食品中猪肉和鸡肉成分Taqman探针实时荧光PCR检测方法的建立

• 作者: 何玮玲 周光宏 程欣 胡序建 黄明
• 来源期刊: 中国农业科学
• 关键词: 扩增内标 检测 实时荧光PCR 鸡肉成分 猪肉成分
• 年，卷（期）: 2013,（21）
• 所属期刊栏目: 贮藏?保鲜?加工
• 页码范围: 4578-4585
• 页数: 8页
• 语种: 中文
• DOI: 10.3864/j.issn.0578-1752.2013.21.021

摘要

[目的]建立含有扩增内标（IAC，Internal amplification control）的用于食品中猪肉和鸡肉成分鉴别的Taqman探针实时荧光PCR检测方法。[方法]分别基于猪的beta actin 基因和鸡的transforming growth factor 基因设计引物和探针；考察引物和探针的特异性与灵敏度；设计并构建扩增内标，优化体系中扩增内标浓度，建立内标实时荧光PCR体系；使用该检测体系对鲜肉和熟肉来源的DNA模板进行检测评价；应用该体系对市售38份样本进行盲样检测。[结果]含有扩增内标的Taqman探针实时荧光PCR体系能有效地进行食品中猪肉和鸡肉成分的快速检测，非目标物种在40个循环内均无出现扩增，检出限均为0.5 ng DNA；该体系对鲜肉和熟肉来源的DNA模板检测无显著差异；对市售食品样本的鉴别验证了方法的实用价值。[结论]该方法准确稳定，可用于食品中猪肉和鸡肉成分的快速检测。