DUSP9真核表达载体的构建及其在Hepa1-6肝细胞中的表达

• 作者: 于国辉 向加林 尹玲 杨艳 欧阳旭红
• 来源期刊: 重庆医学
• 关键词: 真核表达载体 Hepa1-6肝细胞 实时荧光定量PCR DUSP9基因
• 年，卷（期）: 2013,（13）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 1490-1492
• 页数: 3页
• 字数: 3128字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-8348.2013.13.017

摘要

目的 构建小鼠DUSP9基因真核表达载体,并在小鼠Hepa1-6肝细胞中表达DUSP9蛋白.方法 采用RT-PCR方法,从小鼠肝组织获取DUSP9 cDNA片断,经双酶切、连接重组至真核表达载体pEGFP-N1,构建pEGFP DUSP9重组质粒,双酶切及DNA测序对该重组质粒进行鉴定.脂质体介导pEGFP-DUSP9转染Hepa1-6肝细胞,实时荧光定量PCR、Western blot检测DUSP9 mRNA及蛋白表达水平的变化.结果 pEGFP DUSP9重组质粒经双酶切及测序鉴定证明构建完全正确,成功转染Hepa1-6肝细胞并高效表达,检测到明显上调的DUSP9 mRNA和蛋白表达水平.结论 成功构建真核表达载体pEGFP-DUSP9,并在Hepa1-6肝细胞中表达了DUSP9蛋白,可为研究DUSP9的生理功能及了解其在糖、脂代谢、胰岛素抵抗进程中的作用奠定坚实的基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	杨艳	遵义医学院附属医院医学检验科	73	199	7.0	9.0
2	欧阳旭红	遵义医学院附属医院医学检验科	27	81	5.0	7.0
3	向加林	遵义医学院附属医院医学检验科	24	75	5.0	7.0
4	尹玲	遵义医学院附属医院医学检验科	28	53	4.0	5.0
5	于国辉	遵义医学院医学检验系	1	0	0.0	0.0