人斯钙素1在大肠杆菌中的重组表达与活性鉴定

• 作者: 刘培培 刘广芝 孙君波 张菊新 董创创
• 来源期刊: 军事医学
• 学科: 医学
• 关键词: 斯钙素1 原核表达 包涵体复性 磷酸盐重吸收
• 年，卷（期）: 2014,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 39-43
• 页数: 5页
• 分类号: R711.75
• 字数: 4814字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7644/j.issn.1674-9960.2014.01.011

摘要

目的：通过原核表达的方法得到有活性的斯钙素1（ STC1）重组蛋白。方法将优化合成的STC1 DNA片段克隆到表达载体pET-32 b（＋）上，重组质粒转入大肠杆菌诱导表达，在变性条件下纯化包涵体，经透析复性得到可溶的斯钙素1融合蛋白，凝血酶酶切后用高亲和镍离子树脂吸附多余多肽获得目的蛋白。 Western印迹分析验证目的蛋白免疫活性。动物实验检测目的蛋白的生物学活性。结果构建了pET-32b（＋）-STC1表达载体，表达并纯化了STC1融合蛋白包涵体，经复性、凝血酶切和纯化后获得可溶的目的蛋白。 Western印迹分析验证正确。生物学活性检测表明重组STC1能增加大鼠排泄系统对磷酸盐的重吸收。结论获得了具有生物学活性的斯钙素1重组蛋白，为制备STC1单克隆抗体和进一步研究STC1与肿瘤治疗的关系奠定了基础。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘广芝		25	100	5.0	9.0
2	张菊新		12	82	6.0	9.0
3	董创创		2	7	1.0	2.0
4	刘培培		4	10	2.0	3.0
5	孙君波		1	0	0.0	0.0