细粒棘球绦虫p38蛋白原核表达及其多克隆抗体制备

• 作者: 刘辉 吕国栋 张富春 林仁勇 王红丽
• 来源期刊: 中国人兽共患病学报
• 学科: 医学
• 关键词: 细粒棘球绦虫 p38 蛋白表达 抗体制备
• 年，卷（期）: 2014,（1）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 27-31
• 页数: 5页
• 分类号: R383.3
• 字数: 969字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/cjz.j.issn.1002-2694.2014.01.006

摘要

目的 制备细粒棘球绦虫(Eg)p38蛋白的多克隆抗体,为进一步研究Egp38蛋白的功能提供检测抗体.方法 将Egp38蛋白基因序列克隆至原核表达载体pET28a,转化E.coli BL21株,IPTG诱导蛋白表达,以Ni亲和层析纯化Egp38蛋白,免疫家兔,收集免疫血清,ELISA 测定抗体效价,Western blotting检测所制备抗体与Eg虫体天然Egp38蛋白的反应性.结果 经0.2 mmol/L IPTG诱导,表达出约46 kDa的Egp38重组蛋白,制备获得效价在2.56×105以上的多克隆抗体,该抗体能够与Egp38重组蛋白和Eg蚴虫体内的Egp38蛋白发生特异性反应.结论 成功制备获得兔抗Egp38多克隆抗体,为研究Egp38在Eg与宿主间的交互作用中的功能和作为药物靶标等研究奠定基础.