日本脑炎病毒NS3蛋白酶活性检测及抑制剂高通量筛选方法的建立

• 作者: 周景云 宋云峰 汪雪 裴超 陈焕春
• 来源期刊: 生物工程学报
• 关键词: 日本脑炎病毒 NS3蛋白酶 可溶性表达 酶活性 抑制剂高通量筛选
• 年，卷（期）: 2014,（2）
• 所属期刊栏目: 动物及兽医生物技术
• 页码范围: 194-202
• 语种: 中文
• DOI: 10.13345/j.cjb.130235

摘要

日本脑炎病毒(Japanese encephalitis virus,JEV)是单股正链RNA病毒,全基因组仅含有一个开放阅读框,编码一条多聚蛋白前体,病毒编码的NS3蛋白酶在JEV多聚蛋白加工过程中起着重要作用,是重要的药物靶标.通过PCR扩增了NS2BH-NS3蛋白酶的编码区,构建了原核表达质粒并转化到大肠杆菌BL21 (DE3),经IPTG诱导得到可溶性的NS3蛋白酶,用镍亲和层析方法进行了纯化.建立了基于荧光共振能量转移的NS3蛋白酶活性检测方法,并确定了最佳的反应条件,对1 13个化合物进行了筛选,发现其中两个化合物对JEV NS3蛋白酶具有一定的抑制活性.本研究为JEV NS3蛋白酶的活性研究及抑制剂筛选提供了一种操作方便、成本低廉的方法.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈焕春	华中农业大学农业微生物学国家重点实验室	331	4866	36.0	53.0
5	宋云峰	华中农业大学农业微生物学国家重点实验室	13	139	6.0	11.0
9	周景云	华中农业大学农业微生物学国家重点实验室	1	0	0.0	0.0
13	汪雪	华中农业大学动物医学院	3	2	1.0	1.0
14	裴超	华中农业大学动物医学院	2	0	0.0	0.0