人源溶菌酶基因LYZL4在毕赤酵母中的重组表达及活性测定

• 作者: 余龙 李新新 陶建军
• 来源期刊: 中国生物工程杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: 重组人溶菌酶LYZL4 毕赤酵母 溶菌活性
• 年，卷（期）: 2014,（1）
• 所属期刊栏目: 技术与方法
• 页码范围: 79-85
• 分类号: Q78
• 语种: 中文
• DOI: 10.13523/j.cb.20140112

摘要

LYZL4是本实验室克隆的一种c型人溶菌酶基因,根据毕赤酵母密码子偏爱性对LYZL4基因进行优化设计,优化后的基因克隆至具有乙醇氧化酶启动子(AOX1)的pPIC9K载体中.通过电转化方法整合到甲醇营养型毕赤酵母表达菌株GS115基因组上,再利用不同浓度梯度的G418抗性YPD固体培养基筛选高拷贝转化子,经摇瓶发酵后,其上清液在SDS-PAGE胶上14.4 kDa处出现明显的蛋白条带,该蛋白条带经质谱鉴定证实是人LYZL4蛋白.以人溶菌酶(164 071U/mg)作为标准品,使用艳红微球菌作为底物,通过比色法测定重组LYZL4溶菌酶蛋白的活性,结果显示重组人溶菌酶LYZL4蛋白具有明显的溶菌活性,其酶活力可达38893U/ml.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	余龙	复旦大学遗传工程国家重点实验室遗传学研究所	64	387	11.0	17.0
2	陶建军	复旦大学遗传工程国家重点实验室遗传学研究所	3	14	2.0	3.0
3	李新新	复旦大学遗传工程国家重点实验室遗传学研究所	2	12	2.0	2.0