禽分枝杆菌副结核亚种hsp65与鹅副黏病毒HN融合基因真核表达载体的构建与表达

• 作者: 么乃全 姜秀云 徐凤宇 李淑君 王春芳 胡桂学 胡静涛 马红霞 高云航
• 来源期刊: 中国兽药杂志
• 学科: 农学
• 关键词: 鹅副黏病毒 血凝素神经氨酸酶 禽分枝杆菌副结核亚种 热休克蛋白65 构建 表达
• 年，卷（期）: 2014,（4）
• 所属期刊栏目: 微生物与免疫
• 页码范围: 5-10
• 页数: 6页
• 分类号: S852.65
• 字数: 4021字
• 语种: 中文

摘要

为探索禽分枝杆菌副结核亚种(MAP)的热休克蛋白65(hsp65)对鹅副黏病毒(GPMV)血凝素神经氨酸酶(HN)的分子佐剂作用及构建GPMV DNA疫苗,针对GPMV的HN基因和MAP的hsp65基因设计引物,PCR克隆扩增两个基因,分别将二者先后与真核表达载体pVAX1连接,构建了pVAX1-HN、pVAX1-hsp65-HN,并通过PCR、酶切和序列鉴定所获重组质粒;应用脂质体法将其转染至Marc- 145细胞,RT-PCR和间接免疫荧光试验证实hsp65和HN在Marc-145细胞中获得了表达.本研究为制备新型GPMV DNA疫苗及探索hsp65在DNA疫苗中的应用奠定了基础.