微小隐孢子虫类钙调蛋白基因真核表达质粒的构建及在Hela细胞中的表达

• 作者: 刘宇轩 周鹏 杨晓娇 王向佩 王晓娟 石凯 米荣升 雷晓思 黄燕
• 来源期刊: 中国兽医科学
• 学科: 农学
• 关键词: 微小隐孢子虫 类钙调蛋白基因 真核表达质粒
• 年，卷（期）: 2014,（5）
• 页码范围: 485-491
• 页数: 7页
• 分类号: S852.723
• 语种: 中文

摘要

为了构建微小隐孢子虫类钙调蛋白(calmodulin-like protein,CML)基因的真核表达质粒,并在Hela细胞中实现表达,以微小隐孢子虫卵囊cDNA为模板,通过PCR扩增CML基因,插入到克隆载体pMD18-T中.对经鉴定的pMD-CML重组质粒进行双酶切,将目的基因连接到经同样内切酶双酶切的真核表达载体pVAX1上.重组质粒经双酶切分析和测序鉴定后,用FuGENE HD转染试剂介导的方法,将重组表达质粒转染Hela细胞,用Western-blot技术和间接免疫荧光法检测外源基因的表达.结果显示,成功构建了微小隐孢子虫CML基因的真核表达质粒pVAX-CML,重组质粒在Hela细胞中实现了表达,表达产物具有良好的反应原性,为研究CML的特性和功能、寻找新的防控技术奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	周鹏	中国农业科学院上海兽医研究所	20	66	5.0	8.0
2	黄燕	中国农业科学院上海兽医研究所	29	271	7.0	16.0
3	米荣升	中国农业科学院上海兽医研究所	10	7	1.0	2.0
4	王晓娟	中国农业科学院上海兽医研究所	4	12	2.0	3.0
5	杨晓娇	中国农业科学院上海兽医研究所	2	0	0.0	0.0
6	王向佩	中国农业科学院上海兽医研究所	2	0	0.0	0.0
7	石凯	中国农业科学院上海兽医研究所	2	0	0.0	0.0
8	刘宇轩	中国农业科学院上海兽医研究所	1	0	0.0	0.0
9	雷晓思	中国农业科学院上海兽医研究所	1	0	0.0	0.0