A型口蹄疫病毒多抗原表位杆状病毒表达载体的构建及表达

• 作者: 刘新生 吕建亮 周鹏 张中旺 张永光 方玉珍 李登科 潘丽 蒋守田
• 来源期刊: 中国兽医科学
• 学科: 农学
• 关键词: A型口蹄疫病毒 多抗原表位 Sf9细胞 表达
• 年，卷（期）: 2014,（9）
• 页码范围: 881-886
• 页数: 6页
• 分类号: S852.659.6
• 语种: 中文

摘要

为构建A型口蹄疫病毒(FMDV)多抗原表位杆状病毒表达载体,将A型FMDV上5个B细胞表位(VP1140160aa、VP270-80aa、VP35267aa、3B2942aa和3D1630aa)和4个辅助性T细胞表位(VP1200-213aaVP420-34aa、3A21-35aa和3D346-370aa)通过人工合成的方法串联起来构建复合多表位基因B.然后将其克隆至杆状病毒表达载体pFastBac HTB.将酶切和测序鉴定正确的阳性重组质粒pFastBac HTB-B转化至大肠杆菌DH10 Bac感受态细胞进行蓝白斑筛选.将PCR鉴定正确的重组杆状病毒质粒利用CellfectinⅡReagent转染至Sf9细胞.通过间接免疫荧光试验和Western-blot检测表达情况.结果显示,能够得到与A型FMDV猪抗阳性血清结合的蛋白,大小约为22.3 ku,与预期结果相符.结果表明,成功构建了A型FMDV多抗原表位杆状病毒表达载体,并在昆虫细胞中正确表达,为下一步蛋白纯化奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	吕建亮	中国农业科学院兰州兽医研究所	6	15	2.0	3.0
2	张永光	中国农业科学院兰州兽医研究所	36	318	11.0	17.0
3	周鹏	中国农业科学院兰州兽医研究所	20	66	5.0	8.0
4	潘丽	中国农业科学院兰州兽医研究所	18	48	4.0	6.0
5	刘新生	中国农业科学院兰州兽医研究所	4	1	1.0	1.0
6	方玉珍	中国农业科学院兰州兽医研究所	7	1	1.0	1.0
7	张中旺	中国农业科学院兰州兽医研究所	5	22	1.0	4.0
8	蒋守田	中国农业科学院兰州兽医研究所	4	0	0.0	0.0
9	李登科	中国农业科学院兰州兽医研究所	1	0	0.0	0.0