细胞穿透肽TAT融合小鼠nNOS1-133重组蛋白的表达纯化及药效学研究

• 作者: 张宇 朱东亚 朱珠
• 来源期刊: 药学与临床研究
• 学科: 医学
• 关键词: TAT-nNOS1-133 分离纯化 脑卒中 重组蛋白
• 年，卷（期）: 2014,（1）
• 所属期刊栏目: 药学研究
• 页码范围: 15-19
• 页数: 5页
• 分类号: R971|Q78
• 字数: 4315字
• 语种: 中文

摘要

目的:表达、纯化有活性的TAT-nNOS1-133重组蛋白,并初步验证其神经保护作用;为开发新神经保护药物提供理论基础.方法:通过PCR、酶切和酶连的方法构建pET28a-TAT-nNOS1-133重组质粒,并转化入大肠杆菌中表达.表达产物经洗涤、复性、阴离子交换柱(DEAE-52)、超滤纯化并除盐.通过FITC标记目的蛋白评价其能否进入细胞,并通过检测细胞凋亡评价TAT-nNOS1-133对谷氨酸诱导的兴奋性毒性的保护作用.结果:获得了较高纯度的TAT-nNOS1-133重组蛋白,经SDS-PAGE电泳显示相对分子质量在17 kD附近有单一条带,且与理论分子质量一致.TAT-nNOS1-133可以进入神经细胞,并减少了谷氨酸诱导的PI阳性细胞数增多.结论:成功构建了TAT-nNOS1-133的原核表达系统并建立了其分离纯化方案.TAT-nNOS1-133可以进入细胞并且减轻了脑卒中病理模型谷氨酸诱导的兴奋性毒性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	朱东亚	南京医科大学药学院	29	92	6.0	9.0
2	张宇	南京医科大学药学院	24	72	3.0	8.0
3	朱珠	南京医科大学药学院	27	149	6.0	11.0