北京棒杆菌AS1.299高丝氨酸脱氢酶突变体L200F/D215K的异源表达及酶学性质

• 作者: 方丽 朱运明 申术霞 许金坤 闵伟红
• 来源期刊: 微生物学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 北京棒杆菌 高丝氨酸脱氢酶 异源表达 酶学性质
• 年，卷（期）: 2014,（10）
• 所属期刊栏目: 酶和蛋白质
• 页码范围: 1178-1184
• 分类号: Q814
• 语种: 中文
• DOI: 10.13343/j.cnki.wsxb.2014.10.010

摘要

[目的]对北京棒杆菌Corynebacterium pekinense高丝氨酸脱氢酶(homoserine dehydrogenase,HSD)进行空间结构改造从而获得优良性能新酶.[方法]利用定点突变技术构建HSD双突变体L200F/D215A、L200F/D215E、L200F/D215G和L200 F/D215K,并将其转入大肠杆菌E.coli BL21中进行高效表达,选取催化效率最高的双突变体L200F/D215K与双突变前的L200F进行动力学和酶学性质比较.[结果]HSD双突变体L200 F/D215K的Vmax为36.92 U/mg,较L200F提高1.24倍;最适反应温度为37℃,较L200F提高2℃;最适反应pH为7.5,与L200F经验值相同;最适温度下的半衰期为4.16 h,较L200F提高1.12倍;L200 F/D215K和L200F对有机溶剂和金属离子均表现出较好的抗性.[结论]HSD通过空间结构改造活力得到提高,并且其酶学性质得到优化.本研究有助于认识HSD突变体的酶学性质,为其新酶的研发利用提供有力依据.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	闵伟红	吉林农业大学食品科学与工程学院	113	614	13.0	20.0
3	方丽	吉林农业大学食品科学与工程学院	28	85	5.0	8.0
7	朱运明	吉林农业大学食品科学与工程学院	2	11	1.0	2.0
11	申术霞	吉林农业大学食品科学与工程学院	1	0	0.0	0.0