链霉菌M-Z18膜蛋白ε-聚赖氨酸降解酶的分离纯化、酶学性质及应用

• 作者: 刘庆瑞 曾昕 毛忠贵 陈旭升 韩岱
• 来源期刊: 微生物学报
• 学科: 生物学
• 关键词: ε-聚赖氨酸降解酶 链霉菌 分离纯化 聚合度 最小抑菌浓度
• 年，卷（期）: 2014,（9）
• 所属期刊栏目: 酶和蛋白质
• 页码范围: 1022-1032
• 分类号: Q814
• 语种: 中文
• DOI: 10.13343/j.cnki.wsxb.2014.09.007

摘要

[目的]研究链霉菌Streptomyces sp.M-Z18 ε-聚赖氨酸降解酶(Pld)的分离纯化及其生理生化特性,并利用该酶制备低聚合度ε-聚赖氨酸(ε-PL).[方法]菌体细胞经超声破碎、NaSCN溶解和HiTrapTM Butyl HP疏水层析制备到Pld,随后研究了其酶学性质、动力学和降解ε-PL过程,最后利用常量稀释法比较了不同聚合度范围ε-PL的最小抑菌浓度.[结果]从Streptomyces sp.M-Z18细胞膜上分离纯化到Pld,纯化倍数为80.4倍,回收率达到59.3％.以L-赖氨酰对硝基苯胺为底物,酶促反应的最适温度为37℃,最适pH为7.0,动力学常数Km为0.621 mmol/L,Vmax为701.16 nmoL/min·mg;酶活在pH 7.0-10.0和50℃以下稳定.降解ε-PL实验发现,纯化到的Pld以内切方式降解ε-PL.抑菌实验表明,高聚合度ε-PL(30-35)对细菌的抑制效果较好,而低聚合度ε-PL(8-20)更有利于抑制酵母菌的生长,各种聚合度ε-PL对霉菌的生长抑制均较差.[结论]从ε-PL产生菌中分离纯化到内切型ε-PL降解酶,发现不同聚合度范围ε-PL对微生物的抑制能力存在显著差异.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	毛忠贵	江南大学生物工程学院工业生物技术教育部重点实验室	175	1381	18.0	29.0
2	陈旭升	江南大学生物工程学院工业生物技术教育部重点实验室	27	77	6.0	7.0
3	刘庆瑞	江南大学生物工程学院工业生物技术教育部重点实验室	2	2	1.0	1.0
4	曾昕	江南大学生物工程学院工业生物技术教育部重点实验室	3	5	2.0	2.0
5	韩岱	江南大学生物工程学院工业生物技术教育部重点实验室	3	8	2.0	2.0