新孢子虫表面抗原P40基因的克隆及原核表达

• 作者: 宫鹏涛 常乐 张国才 李建华 李赫 杨举 杨滨僮 贺鹏飞 赵权
• 来源期刊: 中国生物制品学杂志
• 学科: 农学
• 关键词: 新孢子虫 P40基因 原核细胞 基因表达
• 年，卷（期）: 2014,（6）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 789-792
• 分类号: S855.9+1|Q786
• 语种: 中文

摘要

目的 克隆并原核表达新孢子虫表面抗原P40基因.方法 PCR扩增新孢子虫表面抗原P40基因,克隆至原核表达载体pET-28a中,构建重组原核表达质粒pET-28a-P40,转化入大肠埃希菌Rosseta(DE3),IPTG诱导表达,SDS-PAGE和Western blot鉴定表达产物.结果 重组原核表达质粒pET-28a-P40经PCR及双酶切鉴定构建正确;表达的重组P40蛋白相对分子质量约为40 000,有效识别鼠抗新孢子虫阳性血清.结论 成功在Rosseta(DE3)中表达了新孢子虫表面抗原P40基因,为新孢子虫病疫苗的研制及血清学检测方法的建立奠定了基础.