点饱和突变提高腈水解酶不对称合成L-2-氨基丁酸的酶活

• 作者: 周海岩 张旺 徐建妙 柳志强 郑裕国
• 来源期刊: 工业微生物
• 关键词: 腈水解酶 2-氨基丁腈 L-2-氨基丁酸 不对称合成 点饱和突变
• 年，卷（期）: 2015,（6）
• 所属期刊栏目: 研究与应用
• 页码范围: 1-8
• 页数: 8页
• 字数: 5217字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1001-6678.2015.06.001

摘要

为了提高腈水解酶催化外消旋2-氨基丁腈不对称合成L-2-氨基丁酸的能力,首先从实验室的腈水解重组大肠杆菌中筛选获得了一株立体选择性较高的菌株E.coli BL21 (DE3)/pET-28b-bll6402.通过对其腈水解酶Nitbll6402进行三维结构同源模建和"热点"氨基酸分析,选择了6个位于"疏水口袋"附近的氨基酸残基(Y198、P239、P272、K251、E240和M234)进行点饱和突变,得到酶活力明显提高的突变型腈水解酶E240G和K251C.在60 mmol/L底物下,生成的L-2-氨基丁酸的e.e值均为100％,浓度分别为5.43g/L和5.29 g/L,比原始酶分别提高了63％和59％.此结果表明,E240G或K251C的单点突变均能在不影响立体选择性的前提下不同程度的提高腈水解酶Nitbll6402合成L-2-氨基丁酸的能力,这将为利用腈水解酶催化合成L-2-氨基丁酸的进一步研究奠定重要的理论基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	郑裕国	浙江工业大学生物工程研究所	182	1210	17.0	26.0
2	柳志强	浙江工业大学生物工程研究所	49	211	7.0	12.0
3	徐建妙	浙江工业大学生物工程研究所	14	85	4.0	9.0
4	周海岩	浙江工业大学生物工程研究所	5	14	3.0	3.0
5	张旺	浙江工业大学生物工程研究所	1	2	1.0	1.0