水貂肠炎病毒VP2基因原核表达及鉴定

• 作者: 张淼 杨勇 林鹏 王建科 王红梅 程世鹏 程悦宁 赵航 郭利
• 来源期刊: 经济动物学报
• 学科: 农学
• 关键词: 水貂肠炎病毒 VP2基因 原核表达
• 年，卷（期）: 2015,（3）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 133-139
• 分类号: S865.2+27
• 语种: 中文
• DOI: 10.13326/j.jea.2015.1068

摘要

采用PCR技术扩增MEV VP2基因,将该基因片段定向克隆原核表达载体PET-30a,构建MEV VP2基因原核表达重组质粒PET-30a-VP2.将该重组质粒转化到宿主菌BL21(DE3),IPTG诱导后进行SDS-PAGE和Western-blotting分析.结果表明:该基因全长1 755 bp,其目的基因序列完全正确,能编码584个氨基酸.利用载体上的His标签对其进行纯化,经SDS-PAGE鉴定该重组蛋白以包涵体的形式存在,大小约为70 ku;Western-blotting验证该重组蛋白具有被抗MEV血清识别的特性,具有良好的反应原性,可为MEV基因工程亚单位疫苗、免疫学诊断方法等提供参考.