狂犬病毒糖蛋白的克隆表达及其在中和抗体检测中的应用

• 作者: 冯晓燕 宋晓国 张贺秋 朱翠侠 王国华 郭兰芹 郭在清 阙海萍 黄运洲
• 来源期刊: 生物技术通讯
• 学科: 医学
• 关键词: 狂犬病毒 糖蛋白 优势表位区段抗原 中和抗体检测
• 年，卷（期）: 2015,（4）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 493-496
• 页数: 4页
• 分类号: R392.1|Q78
• 字数: 3107字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-0002.2015.04.010

摘要

目的：制备基因工程表达的狂犬病毒糖蛋白优势表位抗原，并评价其在疫苗免疫后中和抗体检测中的应用价值。方法：TRIzol法从狂犬病疫苗中提取总RNA，经RT-PCR获得糖蛋白目的基因片段，构建相应的原核表达质粒，转化大肠杆菌HB101，诱导表达获得纯化重组蛋白，以重组蛋白作为包被抗原，初步建立检测糖蛋白中和抗体的ELISA方法。结果：获得狂犬病毒糖蛋白优势表位区段抗原，建立了糖蛋白中和抗体ELISA检测方法。该检测方法对59例健康献血员血浆样本检测特异性为98.31%（58/59），接种狂犬疫苗免疫个体血浆样本抗体阳性率为98.95%（94/95）。结论：基因工程表达的狂犬病毒糖蛋白优势表位抗原可用于人接种狂犬疫苗后疫苗免疫效果评价。