解淀粉芽孢杆菌中性蛋白酶基因的克隆与表达

• 作者: 张东杰 杜珊珊 王颖
• 来源期刊: 黑龙江八一农垦大学学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 解淀粉芽孢杆菌 中性蛋白酶 大肠杆菌 克隆 诱导表达
• 年，卷（期）: 2015,（1）
• 页码范围: 51-54,59
• 页数: 5页
• 分类号: Q78
• 字数: 2694字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-2090.2015.01.012

摘要

为了获得高效的中性蛋白酶基因，试验用PCR方法从解淀粉芽孢杆菌中扩增中性蛋白酶基因（npr），通过BamHⅠ、SalⅠ双酶切后，将该基因与表达载体PET-28a连接，同时转入到大肠杆菌BL21中表达，通过SDS-PAGE电泳技术对构建的工程菌的基因表达产物进行分析。获得特异 npr基因序列含1566 bp，编码522个氨基酸，含有完整的ORF，同源性达到100%。蛋白酶的分子量为57.4 kDa。IPTG能诱导中性蛋白酶基因在重组菌进行表达，通过改变IPTG诱导浓度、诱导温度及诱导时间等因素，得出在添加剂IPTG至终浓度为0.8 mmol·L-1，30℃诱导4 h为最佳诱导条件，获得最高酶活为450 U·mL-1。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王颖	黑龙江八一农垦大学食品学院	134	566	11.0	17.0
2	张东杰	黑龙江八一农垦大学食品学院	222	1233	16.0	24.0
3	杜珊珊	黑龙江八一农垦大学食品学院	2	4	2.0	2.0