家蝇幼虫溶菌酶1基因的克隆与真核表达及表达产物抑菌活性的检测

• 作者: 傅小蒙 刘树明 唐艳 孔令聪 李文婷 裴志花 马红霞
• 来源期刊: 中国兽医科学
• 学科: 农学
• 关键词: 家蝇溶菌酶1 巴斯德毕赤酵母 分泌表达 抑菌活性
• 年，卷（期）: 2015,（11）
• 所属期刊栏目: 基础兽医学
• 页码范围: 1184-1188
• 页数: 5页
• 分类号: S852.743
• 语种: 中文
• DOI: 10.16656/j.issn.1673-4696.2015.11.014

摘要

采用PCR扩增获得家蝇溶菌酶1基因(Musca domestica lysozyme-1,MdL-Ⅰ),构建真核重组表达质粒pPIC9K-MdL-Ⅰ.将线性化的重组质粒电击转入巴斯德毕赤酵母感受态GS115细胞内.将PCR鉴定为阳性的重组酵母菌进行甲醇诱导表达,并采用Tricine-Tris-SDS-PGAE检测表达产物的大小;经镍柱亲和层析纯化获得纯度较高的重组蛋白,采用管碟法检测重组蛋白的生物学活性.结果显示,重组质粒pPIC9K-MdL-Ⅰ获得高效表达,蛋白质的分子质量为14.2 ku,管碟法检测重组蛋白对大肠杆菌、雏沙门菌均具有体外抑菌活性.本研究为利用毕赤酵母表达系统规模化生产具有抑菌活性的MdL-工蛋白奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	马红霞		149	619	13.0	17.0
2	裴志花		63	143	6.0	9.0
3	孔令聪		32	143	8.0	11.0
4	唐艳		6	0	0.0	0.0
5	刘树明		37	102	5.0	8.0
6	傅小蒙		4	13	1.0	3.0
7	李文婷		2	0	0.0	0.0