人Bcl2基因真核表达载体的构建及其抗凋亡功能研究

• 作者: 冯滢滢 史平安 叶棋浓 吕朝晖 徐小洁 李玲 梁迎春 王涛 范忠义 郭靖 闫志风
• 来源期刊: 生物技术通讯
• 学科: 生物学
• 关键词: 人Bcl2基因 克隆 细胞凋亡
• 年，卷（期）: 2015,（2）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 186-189
• 页数: 4页
• 分类号: Q78|Q25
• 字数: 3380字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-0002.2015.02.007

摘要

目的：构建带myc标签的Bcl2真核表达载体，获得myc-Bcl2融合蛋白，并对其生物学功能进行初步检测。方法：以本实验室保存的乳腺文库为模板，采用PCR技术扩增Bcl2编码序列，将其插入pCMV-myc载体，Western印迹检测表达情况；将重组质粒与空载体分别转染乳腺癌MCF-7细胞，通过流式细胞仪检测pCMV-myc-Bcl2重组质粒对细胞凋亡的影响。结果：双酶切和测序结果表明pCMV-myc-Bcl2真核表达质粒构建成功；转染293T细胞后myc-Bcl2蛋白成功表达；流式细胞仪检测结果显示，myc-Bcl2明显抑制乳腺癌细胞系的凋亡。结论：构建了带myc标签的人Bcl2真核表达载体，为进一步研究Bcl2在细胞凋亡中的功能奠定了基础。