家蝇Thymosin（THY）基因的克隆及原核表达

• 作者: 修江帆 吴建伟 吴高吉 尚小丽 彭传林 王宇 罗曼
• 来源期刊: 生物技术通报
• 关键词: 家蝇 胸腺肽 克隆 原核表达
• 年，卷（期）: 2015,（2）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 143-147
• 页数: 5页
• 语种: 中文
• DOI: 10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2015.02.021

摘要

采用EST测序技术从构建的家蝇（Musca domestica）幼虫cDNA质粒文库中筛选到胸腺肽（Thymosin，THY）基因，以该基因的cDNA文库质粒为模板，设计引物，通过PCR扩增，测序鉴定，获得THY基因完整编码序列。运用生物信息学方法对该基因及其编码蛋白的基本理化性质、信号肽和亚细胞定位等方面进行预测和分析。构建pET-28a（+）-THY重组质粒，转化到大肠杆菌BL21（DE3）中进行诱导表达。研究结果表明，THY基因ORF全长384 bp，编码127个氨基酸，理论分子量14.3 kD，等电点为5.22，具有THY家族的蛋白保守结构域。构建重组原核质粒pET-28a（+）-THY，经IPTG诱导，蛋白在大肠杆菌中获得表达，经亲和层析柱纯化获得目的蛋白，Western blot检测发现纯化的目的蛋白大小正确。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	吴建伟	贵阳医学院基础医学院	83	698	14.0	21.0
2	修江帆	贵阳医学院基础医学院	16	51	4.0	6.0
3	王宇	贵阳医学院基础医学院	18	40	4.0	5.0
7	彭传林	贵阳医学院基础医学院	6	21	3.0	4.0
8	尚小丽	贵阳医学院基础医学院	4	8	2.0	2.0
9	吴高吉	贵阳医学院基础医学院	1	3	1.0	1.0
10	罗曼	贵阳医学院基础医学院	1	3	1.0	1.0