PMA－qPCR 定量检测畜禽肉类中沙门菌活菌的研究

• 作者: 於颖 王文静 陆晔
• 来源期刊: 检验医学
• 学科: 医学
• 关键词: 沙门菌 活菌 叠氮溴化丙啶 荧光定量聚合酶链反应 畜禽肉类
• 年，卷（期）: 2015,（5）
• 所属期刊栏目: 技术研究与评价? 论著
• 页码范围: 500-506
• 页数: 7页
• 分类号: R378.2
• 字数: 5999字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-8640.2015.05.021

摘要

目的：将叠氮溴化丙锭（PMA）与实时荧光定量聚合酶链反应（qPCR）相结合定量检测畜禽肉类中活的沙门菌。方法通过优化光反应时间、PMA 浓度等 PMA 作用条件，建立 PMA－qPCR 方法，构建重组质粒建立标准曲线，考察该方法的灵敏性、特异性，并将该方法用于定量检测未经增菌培养的畜禽肉类样品中的沙门菌。结果在 PMA 浓度为15μg／mL、曝光5 min 的条件下可完全抑制样品中死菌 DNA 的扩增。建立的定量标准曲线循环阈值（Ct 值）与质粒标准品模板的拷贝数呈良好线性关系（r 2＝0．9979），最低可检出10拷贝／反应体系。所建立的 PMA－qPCR 方法最低可检出21拷贝／μL 沙门菌。采用 PMA－qPCR 检测人工染菌鸡肉样品，最低可检出103 CFU／mL沙门菌。结论用 PMA－qPCR 方法可实现定量检测畜禽肉类样品中活的沙门菌，从而达到快速检测的目的。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王文静		78	489	11.0	17.0
2	陆晔		32	168	8.0	11.0
3	於颖	东华大学化学化工与生物工程学院	1	5	1.0	1.0