细菌素Lcn972A产生菌的鉴定及其基因的克隆与序列分析

• 作者: 叶志伟 廖腾达 林俊芳 王艳婷 甘祥武 郭丽琼 郭心悦
• 来源期刊: 食品工业科技
• 学科: 工学
• 关键词: 乳酸乳球菌 Lcn972A基因 分子鉴定 序列分析
• 年，卷（期）: 2015,（21）
• 所属期刊栏目: 生物工程
• 页码范围: 187-191
• 分类号: TS201.3
• 语种: 中文
• DOI: 10.13386/j.issn1002-0306.2015.21.030

摘要

目的:从杏鲍菇子实体与海带中分离的63株乳酸菌中鉴定出产细菌素Lcn972A的菌株,并对细菌素编码基因进行克隆与基因序列分析.方法:采用生物信息学手段对已报道的细菌素Lcn972A编码基因进行分析比较,设计引物,分别以各乳酸菌基因组DNA为模板,利用PCR克隆技术克隆出细菌素Lcn972A的基因,利用生物信息学工具对其核酸序列和预测的蛋白序列进行分析.结果:在63株乳酸菌的基因组样品中有15组被克隆出目的条带,其中杏鲍菇乳酸菌A15与海带乳酸菌CX2样品PCR产物条带清晰稳定性好,经鉴定两样品的乳酸菌株为乳酸乳球菌(Lactococcus lactis).对克隆的细菌素Lcn972A基因测序结果表明该基因序列全长276 bp.生物信息学分析显示该基因编码91个氨基酸,分子量大小22843.3 u,等电点5.33,氨基酸序列为亲水性,二级结构主要由α-螺旋、无规卷曲和延伸链组成.结论:从分离自杏鲍菇子实体乳酸乳球菌A15与海带乳酸乳球菌株CX2的细菌素编码基因及氨基酸序列与报道的有所不同,可能是新的细菌素,该细菌素的抗菌特点有待进一步的研究.