富士苹果中膜结合态多酚氧化酶分离纯化方法

• 作者: 倪元颖 刘芳 温馨 甘芝霖 赵金红
• 来源期刊: 农业机械学报
• 学科: 农学
• 关键词: 富士苹果 多酚氧化酶 分离纯化 膜结合态 离子交换柱层析 串联质谱
• 年，卷（期）: 2015,（2）
• 所属期刊栏目: 农产品加工工程
• 页码范围: 193-197,246
• 分类号: Q814.1|S661.1
• 语种: 中文
• DOI: 10.6041/j.issn.1000-1298.2015.02.029

摘要

以烟台红富士为原料,研究膜结合态多酚氧化酶(mPPO)的分离纯化条件,采用非离子型去污剂结合热诱导方法粗提,硫酸铵分级沉淀,DEAE Sepharose Fast Flow离子交换柱层析方法对mPPO进行纯化,并对其进行串联质谱(LC-MS/MS)分析鉴定.结果表明mPPO提取纯化最佳条件为:超声提取10 min,50％ ～ 80％饱和度硫酸铵沉淀,0.1 mol/L NaCl梯度洗脱.纯化后的mPPO纯度提高了64.30倍,比活力高达387 032.97 U/mg.纯化后的mPPO经SDS-PAGE和Native-PAGE分析均为单一蛋白带,且为亚基分子量67 kDa的二聚体.经串联质谱分析及蛋白数据库鉴定此纯化蛋白为多酚氧化酶.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	倪元颖	中国农业大学食品科学与营养工程学院	116	2342	28.0	43.0
2	刘芳	中国农业大学食品科学与营养工程学院	43	569	14.0	22.0
3	赵金红	中国农业大学食品科学与营养工程学院	14	130	6.0	11.0
4	温馨	中国农业大学食品科学与营养工程学院	10	45	4.0	6.0
5	甘芝霖	中国农业大学食品科学与营养工程学院	5	95	5.0	5.0