水通道蛋白4重组质粒的构建及其在体外对低糖反应的观察

• 作者: 俞晓燕 赵玉武 邓江山
• 来源期刊: 实用医学杂志
• 关键词: 水通道蛋白质4 绿色荧光蛋白质类 转染 细胞水肿
• 年，卷（期）: 2015,（5）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 700-704
• 页数: 5页
• 字数: 2616字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1006-5725.2015.05.003

摘要

目的：构建大鼠水通道蛋白4（aquaporin4， AQP4）重组质粒，检测融合蛋白在CTX-TNA2星形胶质细胞上的表达，同时观察低浓度葡萄糖条件下AQP4对细胞的影响。方法：通过RT-PCR方法从大鼠脑部获取AQP4基因，插入pEGFP-C2质粒中得到pEGFP-C2-AQP4-M23重组质粒，同时转染CTX-TNA2细胞后用不同浓度葡萄糖处理，通过激光共聚焦显微镜检测AQP4在细胞中的表达及低糖条件下对细胞的影响。结果：PCR和酶切鉴定结果显示插入的AQP4基因大小正确，测序结果证实成功构建了pEGFP-C2-AQP4-M23重组质粒；在激光共聚焦显微镜下观察到AQP4主要位于CTX-TNA2细胞膜上；低糖时转染AQP4的星形胶质细胞平均表面积明显高于对照组。结论：本研究成功构建了AQP4重组质粒并在CTX-TNA2细胞上成功表达，同时证实低糖时AQP4参与了星形胶质细胞水肿的形成。