CRISPR敲减猪CMAH基因的质粒构建及慢病毒的包装

• 作者: 牟丽莎 王蕾 蔡志明 谢崇伟
• 来源期刊: 深圳中西医结合杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 慢病毒包装 基因敲减 CMAH基因 CRISPR-Cas9
• 年，卷（期）: 2015,（19）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 1-3,封3
• 分类号: R-332|Q343.1
• 语种: 中文
• DOI: 10.16458/j.cnki.1007-0893.2015.19.001

摘要

目的:构建靶向猪CMAH基因的慢病毒CRISPR-Cas9敲减质粒及进行慢病毒的包装.方法:设计并合成CMAH基因gRNA的靶序列并将其与LentiCRISPR-v2载体连接;连接后转化大肠杆菌DH5α,筛选出重组子后酶切鉴定与测序;制备VSV-G、Rev、Gag/Pol等质粒用于包装慢病毒.结果:成功构建猪CMAH基因CRISPR-Cas9敲减质粒并包装出相应慢病毒.结论:利用CRISPR-Cas9基因编辑技术能够构建敲减猪CMAH基因的质粒并能够使用其包装出病毒,为后续感染猪动脉内皮细胞(porcine aorta endothelial cell,PAEC)细胞敲减CMAH基因及功能验证奠定基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	牟丽莎		5	3	1.0	1.0
2	谢崇伟		4	3	1.0	1.0
3	蔡志明		5	3	1.0	1.0
4	王蕾		1	1	1.0	1.0