YDL080C和LEU2基因敲除对工业黄酒酵母异戊醇生成量的影响

• 作者: 吴殿辉 孙军勇 李晓敏 李童 谢广发 陆健
• 来源期刊: 食品工业科技
• 学科: 工学
• 关键词: 异戊醇 工业黄酒酵母 类丙酮酸脱羧酶基因 β-异丙基苹果酸脱氢酶基因 基因敲除
• 年，卷（期）: 2015,（15）
• 所属期刊栏目: 生物工程
• 页码范围: 189-193
• 分类号: TS201.3
• 语种: 中文
• DOI: 10.13386/j.issn1002-0306.2015.15.032

摘要

通过敲除生成途径中关键酶的编码基因,对异戊醇在工业黄酒酵母N85中的生成进行了研究.采用融合PCR技术,分别构建类丙酮酸脱羧酶基因(YDL080C)缺失组件“YDL080C-URA3-YDL080C”和β-异丙基苹果酸脱氢酶基因(LEU2)缺失组件“LEU2-URA3-LEU2”,转化工业黄酒酵母N85尿嘧啶缺陷型单倍体Na-u(MATa ura3),获得单倍体工程菌Na-y和Na-1.将转化子与亲本分别进行实验室规模的黄酒发酵实验,结果YDL080C缺失工程菌的异戊醇含量与亲本相比没有明显变化,说明类丙酮酸脱羧酶不是该途径关键酶;LEU2缺失工程菌的异戊醇含量降低16.16％,说明糖代谢途径存在,但只占小部分,而其他理化指标无明显差异.