日本鳗鲡绿色荧光蛋白基因的克隆与表达

• 作者: 丁衬衬 奚汉清 陈佩林
• 来源期刊: 生物技术
• 学科: 生物学
• 关键词: 日本鳗鲡 绿色荧光蛋白 克隆
• 年，卷（期）: 2016,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 331-334
• 页数: 4页
• 分类号: Q786
• 语种: 中文
• DOI: 10.16519/j.cnki.1004-311x.2016.04.0057

摘要

[目的]克隆日本鳗鲡绿色荧光蛋白UnaG基因,表达并纯化UnaG蛋白.[方法]从日本鳗鲡中克隆了绿色荧光UnaG基因,并克隆至pET28Aa、pcDNA-Flag质粒中.将重组质粒pcDNA-Flag用脂质体转染到293T细胞巾,用荧光显微镜观察绿色荧光,同时用原核表达系统诱导His-UnaG融合蛋白的表达,用亲和层析和凝胶过滤层析纯化His-UnaGg融合蛋白.[结果]转染人293T细胞后不到24 h,荧光显微镜观察到日本鳗鲡UnaG能被激发出较强的绿色荧光;原核表达并纯化的His-UnaG融合蛋白纯度很高,Western Blot检测为单一条带,蛋白量达3μg/μl.[结论]成功克隆并纯化了UnaG,为进一步研究UnaG的应用奠定基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈佩林		27	154	6.0	11.0
2	奚汉清		15	40	3.0	6.0
3	丁衬衬		9	4	1.0	1.0