人GRB2基因真核表达及其在293T细胞中的定位研究

• 作者: 张佳凤 徐岚 李明 熊玉锋 郝文波 陈达香
• 来源期刊: 生物技术
• 学科: 生物学
• 关键词: GRB2 293T 真核表达 定位
• 年，卷（期）: 2016,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 450-455
• 页数: 6页
• 分类号: Q291
• 语种: 中文
• DOI: 10.16519/j.cnki.1004-311x.2016.05.0077

摘要

[目的]构建人GRB2蛋白真核表达质粒pEnter-GRB2,并观察其在293T细胞中的定位.[方法]从Hela细胞中提取总RNA,通过RT-PCR获得GRB2全长cDNA序列,并将其克隆到真核表达载体pEnter中,构建重组质粒pEnter-GRB2.转染293T细胞24h、36 h和48 h后通过Western Blot检测其表达情况,通过免疫荧光观察其在细胞中的定位情况.[结果]经双酶切及测序鉴定,GRB2开放阅读框正确地构建到了真核表达质粒pEnter中,免疫印迹检测可见大小约为25 kDa的特异性条带,免疫荧光实验表明GRB2蛋白在细胞质和细胞核中均存在.[结论]成功构建了真核表达质粒pEnter-GRB2并在293T细胞中表达,证实GRB2在293T细胞中不仅存在于细胞质中,也存在于细胞核中,为更加深入地研究其生物学功能及机制奠定了理论基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	郝文波		44	69	4.0	5.0
2	李明		212	862	14.0	18.0
3	张佳凤		4	2	1.0	1.0
4	陈达香		3	4	1.0	2.0
5	徐岚		4	1	1.0	1.0
6	熊玉锋		3	3	1.0	1.0