多胺调节因子-1原核表达与多克隆抗体制备

• 作者: 吕亚丰 曾子悦 朱亚利 李论 杨仕坤 王艳林
• 来源期刊: 生物技术
• 学科: 医学
• 关键词: 多胺调节因子-1 原核表达 抗体
• 年，卷（期）: 2016,（6）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 521-525
• 页数: 5页
• 分类号: R392-33
• 语种: 中文
• DOI: 10.16519/j.cnki.1004-311x.2016.06.0088

摘要

[目的]原核表达和纯化人多胺调节因子-1(PMF-1)并以此为抗原制备多克隆抗体.[方法]PCR扩增人PMF-1编码序列并构建原核表达质粒.将此质粒转化大肠杆菌后,IPTG诱导PMF-1蛋白表达并在变性条件下用Ni-NTA树脂纯化.将纯化的PMF-1用作抗原免疫大耳白兔以制备抗PMF-1多克隆抗体.ELISA法检测抗体效价,免疫印迹法和细胞免疫化学法分析抗体特异性.[结果]成功构建PMF-1原核表达质粒,在大肠杆菌中IPTG可诱导该质粒高效表达PMF-1蛋白.以纯化的PMF-1蛋白为抗原免疫大耳白兔后,获得高效价的抗PMF-1抗血清(抗体效价为1:128 000).该抗体能与PMF-1蛋白特异性结合,并可用于PMF-1的免疫印迹和细胞免疫化学分析.[结论]成功建立了人PMF-1原核表达和纯化技术,并制备出高特异性的抗PMF-1多克隆抗体,该抗体可用于PMF-1的免疫印迹分析和细胞免疫化学分析.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王艳林		137	424	11.0	16.0
2	吕亚丰		8	5	2.0	2.0
3	曾子悦		2	0	0.0	0.0
4	杨仕坤		2	0	0.0	0.0
5	李论		2	0	0.0	0.0
6	朱亚利		1	0	0.0	0.0