易错PCR提高粘质沙雷氏菌磷脂酶A1活性

• 作者: 朱昊 王洲 王玉满 苏燕南 薛正莲
• 来源期刊: 安徽工程大学学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 粘质沙雷氏菌 磷脂酶A1 易错PCR 产酶条件优化
• 年，卷（期）: 2016,（4）
• 所属期刊栏目: 生物与食品科学
• 页码范围: 6-11
• 页数: 6页
• 分类号: Q786
• 字数: 3321字
• 语种: 中文

摘要

利用易错PCR技术对来自粘质沙雷氏菌PL-06的磷脂酶A1基因plaB进行定向改造,通过引入不同浓度Mg2+、Mn2+得到的易错PCR产物与表达型质粒pET-28a(+)重组,构建磷脂酶A1突变文库,筛选出高酶活突变株EPB8.该突变酶相对野生酶酶活提高了22.5％,并对突变株EPB8产酶条件进行优化,优化后酶活较野生酶酶活提高41％.序列分析表明:plaB基因有11个碱基发生突变,导致7个氨基酸发生突变,其中磷脂酶A1蛋白有3个氨基酸突变,分别是y97C、p98S、X228L,辅助蛋白有4个氨基酸突变,分别是p46L、Q58L、N136D、H233R.该实验结果为进一步在分子水平定向提高磷脂酶A1的活性奠定了基础,也为该酶在其他高表达系统中的表达提供了素材.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	薛正莲	安徽工程大学生物与化学工程学院	152	710	15.0	17.0
2	王洲	安徽工程大学生物与化学工程学院	41	98	5.0	7.0
3	苏燕南	安徽工程大学生物与化学工程学院	16	40	4.0	5.0
4	朱昊	安徽工程大学生物与化学工程学院	3	3	1.0	1.0
5	王玉满	安徽工程大学生物与化学工程学院	1	1	1.0	1.0