雷竹SOC1蛋白原核表达及纯化

• 作者: 徐英武 施泉 林新春 汤叶根
• 来源期刊: 南京林业大学学报（自然科学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: 雷竹SOC1蛋白 原核表达 蛋白纯化
• 年，卷（期）: 2016,（3）
• 所属期刊栏目: 专题报道
• 页码范围: 41-46
• 分类号: Q518.2
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-2006.2016.03.007

摘要

为了获得有活性的雷竹PvSOC1蛋白(Phyllostachys violascens SUPPERSSOR OF CO OVEREXPRESSION 1),并进一步讨论其结构形态,通过原核表达方法得到PvSOC1的可溶性重组蛋白,以pET-GST作为表达载体,大肠杆菌E.coli Rosetta作为宿主菌株,超表达全长和IKC结构域的雷竹PvSOC1蛋白.发现在37℃条件下,菌液浓度D(600)值达到0.4～0.6时进行诱导,控制IPTG终浓度为0.4mmol/L,诱导目的蛋白表达5h,可以获得可溶的IKC结构域GST融合蛋白.采用TEV (tobacco etch virus protease)酶切技术、配合GST亲和层析柱及分子层析色谱柱,去除标签蛋白并纯化目的蛋白.所获得的高纯度IKC结构域PvSOC1蛋白经过对比分析发现其以八聚体形式存在.