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牛血清IgG双抗体夹心ELISA定量检测方法的建立及应用
牛血清IgG双抗体夹心ELISA定量检测方法的建立及应用
作者:
叶祥忠
张明祥
胡腾月
苏玉坡
谢鹤
贾继宗
赵风强
韩金乐
基本信息来源于合作网站,原文需代理用户跳转至来源网站获取
牛血清IgG
单克隆抗体
双抗体夹心ELISA
摘要:
目的 建立牛血清IgG(bovine immunoglobulin G,BIgG)抗原的双抗体夹心ELISA定量检测方法.方法 用BIgG-Fc免疫BALB/c小鼠,制备抗BIgG单抗,确定包被抗体及酶标抗体后,建立定量检测BIgG抗原的双抗体夹心ELISA方法,并验证该方法的准确度、精密度、稳定性、特异性,确定该方法的线性范围和定量限度.应用建立的方法检测不同厂家、不同批次牛血清及纯化EV71样品中BIgG抗原残留量.结果 建立了以3EI2D2为包被单抗(8.0 μg/ml,100μl/孔),4A2GIBI-HRP为酶标抗体(1∶1000稀释,100μl/孔)定量检测BIgG的双抗体夹心ELISA方法,该方法的线性范围为0.3~9.6 ng/ml,R2>0.99,定量限度为0.3 ng/ml;回收率在94.1%~108.5%之间,同一实验者重复检测和不同实验者检测的变异系数均<10%;37℃放置3和6d的稳定性均>90%;该试剂样品与BIgG可发生特异性反应,与其他动物源血清无交叉反应.9批牛血清中BIgG含量均存在差异;精纯样品较粗纯样品BSA和BIgG均明显去除,但BIgG占牛血清残留量(BSA+ BIgG)的比例却明显上升.结论 建立的BIgG抗原的双抗体夹心ELISA方法符合定量检测需要,可用于牛血清的质量质控及残留量检测.
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篇名
牛血清IgG双抗体夹心ELISA定量检测方法的建立及应用
来源期刊
中国生物制品学杂志
学科
医学
关键词
牛血清IgG
单克隆抗体
双抗体夹心ELISA
年,卷(期)
2016,(5)
所属期刊栏目
技术方法
研究方向
页码范围
528-532,537
页数
分类号
R392-33
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中文
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单克隆抗体
双抗体夹心ELISA
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期刊影响力
中国生物制品学杂志
主办单位:
中华预防医学会
长春生物制品研究所有限责任公司
出版周期:
月刊
ISSN:
1004-5503
CN:
22-1197/Q
开本:
大16开
出版地:
长春市西安大路3456号
邮发代号:
12-128
创刊时间:
1988
语种:
chi
出版文献量(篇)
5980
总下载数(次)
27
总被引数(次)
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