美洲大蠊i型溶菌酶的原核表达及多克隆抗体制备

• 作者: 张春林 王吉平 王赟 翟素珍
• 来源期刊: 生物技术通报
• 关键词: 美洲大蠊 溶菌酶 原核表达 多克隆抗体
• 年，卷（期）: 2016,（1）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 138-143
• 页数: 6页
• 语种: 中文
• DOI: 10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2016.01.023

摘要

旨在获得美洲大蠊 i 型溶菌酶 PaI 的原核表达蛋白，并制备鼠抗 PaI 多克隆抗体。PCR 扩增 PaI 成熟肽编码序列，构建原核表达载体 pET28a-PaI，诱导表达、纯化 PaI-His 融合蛋白，免疫 Balb/c 小鼠，间接 ELISA 法检测抗血清效价，Western blotting 检测多克隆抗体的特异性。结果显示，PaI 成熟肽部分的编码序列长414 bp，由137个氨基酸组成。构建的原核表达载体pET28a-PaI 在大肠杆菌 Rosetta（DE3）中成功表达，SDS-PAGE 检测显示纯化的 PaI-His 融合蛋白的大小约为18 kD，间接 ELISA和 Western blotting 分析表明免疫小鼠产生的抗血清具有较高的效价和较强的特异性。美洲大蠊溶菌酶 PaI 成功实现原核表达，并获得了高效价特异性多克隆抗体。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	翟素珍	贵州医科大学基础医学院	11	10	2.0	3.0
2	张春林	贵州医科大学基础医学院	16	20	3.0	4.0
3	王赟	贵州医科大学生物与工程学院	18	16	2.0	2.0
4	王吉平	贵州医科大学基础医学院	5	1	1.0	1.0