动物肌肉组织DNA的提取方法及实时荧光定量PCR检测

• 作者: 兰青阔 刘娜 朱珠 王成 王永 赵新 陈锐
• 来源期刊: 食品工业科技
• 学科: 工学
• 关键词: 动物肌肉 SDS法 异硫氰酸胍法 试剂盒法 DNA 实时荧光定量PCR
• 年，卷（期）: 2016,（18）
• 所属期刊栏目: 分析检测
• 页码范围: 74-80
• 分类号: TS251.1
• 语种: 中文
• DOI: 10.13386/j.issn1002-0306.2016.18.006

摘要

以生鲜羊肉、猪肉、鸡肉、牛肉、鸭肉为实验材料,采用SDS法、异硫氰酸胍法、试剂盒法提取动物肌肉组织基因组DNA,对提取的DNA进行琼脂糖凝胶电泳和实时荧光定量PCR检测.结果表明,试剂盒法提取的基因组DNA在浓度和纯度方面均优于SDS法和异硫氰酸胍法.通过对三种提取方法建立的标准曲线进行比较,回归系数(R2)按照质量排序为:试剂盒法≥异硫氰酸胍法＞ SDS法,扩增效率按照质量排序为:试剂盒法＞异硫氰酸胍法＞SDS法.三种提取方法的羊源性成分灵敏度检测,最低检出限均为80 pg/μL,但在低浓度检测时试剂盒法的相对标准偏差RSD为0.684％,小于异硫氰酸胍法0.734％和SDS法1.075％;猪源性成分灵敏度检测,SDS法的最低检出限为80 pg/μL,异硫氰酸胍法和试剂盒法的最低检出限均为16 pg/μL,但在低浓度检测时试剂盒法的相对标准偏差RSD为0.092％,小于异硫氰酸胍法4.640％;鸡源性成分灵敏度检测,SDS法和异硫氰酸胍法的最低检出限均为3.2 pg/μL,试剂盒法的最低检出限为640 fg/μL,明显高于SDS法和异硫氰酸胍法.综上所述,试剂盒法提取的基因组DNA更有利于运用实时荧光定量PCR技术进行食物掺假和物种鉴别工作.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	兰青阔		39	373	12.0	17.0
2	王永		47	487	13.0	19.0
3	赵新		35	365	12.0	17.0
4	朱珠		31	345	12.0	16.0
5	陈锐		19	134	7.0	11.0
6	刘娜		8	52	4.0	7.0
7	王成		7	17	3.0	3.0